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T4 DNA连接酶/T4 DNA Ligase

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简单先容

T4 DNA连接酶/T4 DNA Ligase

产品描述
产品英文名称: T4 DNA Ligase CAS编号: 9015-85-4
别名: T4 DNA连接酶/T4 DNA Ligase 分子式:
含量: % 产品规格: 1000u

 
英文名称:T4 DNA Ligase 
CAS号:9015-85-4
分子量:55.3kDa,单体
级别:BR
来源:含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌

活性定义:是指在ATP-PPi交换反应中,37℃30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸取形式所需的酶量(weiss单位,1weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位:20ul反应体系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)5-DNA末端)中,在16℃30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量) 
抑制剂:当反应体系中NaC1KC1的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意:T4 DNA LigaseDNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率,为避免此现象,电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下:样本与Fermentas企业6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存;转化时,连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%;电转化之前,先用氯仿抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase,然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测:粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状(以下信息仅供参考):液体。该酶催化双链DNARNA中毗邻的5磷酸基团和3-羟基末端之间形成磷酸二酯键,还可以修复双链DNARNADNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNARNADNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性
保存: -20°C


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